Talaj biológiai aktivitásának mérése dehidrogenáz enzimaktivitással (szabvány szerint)

Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Tanszék, Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudományi Tanszék, Környezeti Mikrobiológia és Biotechnológia Kutatócsoport

Szervezet/Adatszolgáltató neveBudapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Tanszék, Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudományi Tanszék, Környezeti Mikrobiológia és Biotechnológia Kutatócsoport
Kapcsolattartó személy neve
Dr. Molnár Mónika, Dr. Feigl Viktória
Módszer neveTalaj biológiai aktivitásának mérése dehidrogenáz enzimaktivitással (szabvány szerint)
A fejlesztés fázisa
alkalmazott
Szabvány száma
MSZ-08-1721/3-86
A módszer típusa
Laboratóriumi teszt: Akut toxicitás vizsgálata
Egyéb típus
talaj biológiai aktivitása
Toxicitás teszteknél
Légzés: O2 fogyasztás, CO2 termelés, enzimaktivitások, ATP termelés
Egyéb teszt típusnál
enzim aktivitás
Teszt végpontja
EC20 / EC50 (Effective Concentration)
Egyéb végpont
szaporodás
Alkalmazott fajok száma
Egy fajt alkalmazó teszt
Tesztorganizmus
Baktérium
Expozíciós szcenárió
Levegő jellemzése
Teszt időtartama
Rövid idejű = akut
A kivitelezéshez szükséges eszköz/műszer
spektrofotométer
Egyéb szükséges berendezés/segédeszköz
mérleg, hűtő-fűtő termosztát, szárítószekrény, kémcsőkeverő, redős szűrőpapír
Milyen reagensek/segédanyagok szükségesek a kivitelezéshez
3% TTC oldat, metanol, Ca-karbonát, trifenil-formazán,
Mennyi mintát igényel
20g
Hány alkalmazásra képes egy ember, egy munkanap alatt, egy készülékkel
25
Milyen szintű az adatfeldolgozás
Az adatok bevitele személyi számítógépbe, kiértékelés excel vagy más szoftver segítségével
Legalább milyen szakképzettség szükséges a kivitelezéshez
Középfokú (vegyésztechnikus, vegyipari szakmunkás, laboratóriumi asszisztens)
Milyen laboratórium szükséges a kivitelezéshez
Általános kémiai analitikai laboratórium
A berendezés beszerzési ára
500.000 - 1.000.000 HUF
Munkaerőköltség/mérés
2 000 - 5 000 HUF
Összes költség/mérés
5 000 - 10 000 HUF
Rövid lényegretörő leírás, az újdonság magyarázatával

A talajmikroorganizmusok enzimjeinek (pl. dehidrogenáz enzim, mely a hidrogén átvitelét katalizálja a redukált hidrogén donorról az oxidált hidrogén akceptor szubsztrátra) biológiai és ökológiai szerepe van a talaj anyagcseréjének fenntartásában. A talaj dehidrogenáz aktivitása jól jellemzi a talaj-mikroorganizmusok általános metabolikus aktivitását. A dehidrogenáz aktivitás változása jól használható mutató a talaj mikroflórájának anyagcseréjében bekövetkezett változások vizsgálatára.

A módszer tipikus (javasolt) alkalmazásai

A talaj mikroflórájának anyagcseréjében bekövetkezett változások vizsgálatára.
Talajhoz adott szennyezőanyag hatásának mérésére.
Talajhoz adott szennyezőanyag biodegradálhatóságának mérésére.
Talajremediáció hatásának mérésére.

Van-e protokoll
igen
Részletes protokoll

A talajminta aktuális dehidrogenáz enzimaktivitásának meghatározását három ismétlésben, egy kontroll alkalmazásával végezzük. 20.00 g eredeti nedvességű talajt Petri-csészében összekeverünk 0.20 g CaCO3-al.
Az így kezelt talajból 4x3,00 g-ot 105x15 mm-es Wassermann-csövekbe mérünk. A kontrollt szárítószekrényben, 180°C-on sterilezzük 3 órán keresztül.
Az eljárás a kontroll és a bemért három párhuzamos talajnál a továbbiakban megegyezik.
A Wassermann-csövekbe 1,00-1,00 cm3 3% (m/m) TTC oldatot és 2,50-2,50 cm3 desztillált vizet adagolunk. A csöveket lezárjuk és tartalmukat
összekeverjük, majd a talajszuszpenziót 24 óráig 37 °C-os termosztátban inkubáljuk.
Az inkubációs idő letelte után a szuszpenziót, a Wassermanncsőből metanollal maradéktalanul beöblítve, analitikai tölcsérbe helyezett előnedvesített szűrőpapíron keresztül 50 cm3-es mérőlombikba szűrjük. Metanollal több részletben mossuk a szűrőn maradt szuszpenziót, 50 cm3 szűrlet végtérfogatig. A mérőlombikot jelig töltjük. A metanol a képződött formazán (TPF) oldószere.
A lombikokat csiszolt üvegdugóval gondosan lezárjuk.
A formazán vörös színének intenzitását 485 nm-en,spektrofotométeren mérjük, metanollal szemben.
A 0,0005-0,1 mg/cm3 koncentrációjú formazán kalibráló sorozat tagjait ugyancsak 485 nm-en mérjük, metanolt használva referenciaként.
A grafikusan készített kalibrációs görbe segítségével állapítjuk meg a talajoldat szűrletek formazán koncentrációját.

Költség
4-kicsi
Időigény
4-kicsi
Munkaigény
3-közepes
Felszerelés, műszerigény
3-közepes
Szakember-igény
3-közepes
Környezeti és munkahelyi kockázatok
4-kicsi
Környezeti realitás
4-jó
Igényeknek megfelelő pontosság
5-kiváló
Reprodukálhatóság
4-jó
Költséghatékonyság
4-jó
Alkalmazhatóság
4-jó
Elérhetőség
5-kiváló
Ismertség
4-jó
Erősségek

A telítetlen talaj mikrobiológiai aktivitását jól jellemző teszt.
Több célra használható, beavatkozások hatása is mérhető.

Gyengeségek

A mennyiségi jel (dehidrogenáz aktivitás) mögött álló diverzitás-változások nem érzékelhetőek. A mérési eredmény interpretálása nehéz.

Lehetőségek

Direkt kontakt teszt fejleszthető belőle.

Veszélyek

Hamis interpretáció lehetséges.

Lényeges szempontok, érdekességek, saját megjegyzések

A fény befolyásolja a színes termék képződését, zavaró hatású lehet. Ezért fénytől elzárva kell végezni a tesztet.

Publikációk

MSZ-08-1721/3-86

Adatlap azonosító (eredeti)
179
Bevivő
Tolner Mária
Státusz
Publikált
Adatlap típusaBiológiai, ökotoxikológiai felmérési és monitoring módszerek
Létrehozás
Módosítás