Budapest University of Technology and Economics, Department of Applied Biotechnology and Food Science, Environmental Microbiology and Biotechnology Group
A talajmikroorganizmusok enzimjeinek (pl. dehidrogenáz enzim, mely a hidrogén átvitelét katalizálja a redukált hidrogén donorról az oxidált hidrogén akceptor szubsztrátra) biológiai és ökológiai szerepe van a talaj anyagcseréjének fenntartásában. A talaj dehidrogenáz aktivitása jól jellemzi a talaj-mikroorganizmusok általános metabolikus aktivitását. A dehidrogenáz aktivitás változása jól használható mutató a talaj mikroflórájának anyagcseréjében bekövetkezett változások vizsgálatára.
A talaj mikroflórájának anyagcseréjében bekövetkezett változások vizsgálatára.
Talajhoz adott szennyezőanyag hatásának mérésére.
Talajhoz adott szennyezőanyag biodegradálhatóságának mérésére.
Talajremediáció hatásának mérésére.
A talajminta aktuális dehidrogenáz enzimaktivitásának meghatározását három ismétlésben, egy kontroll alkalmazásával végezzük. 20.00 g eredeti nedvességű talajt Petri-csészében összekeverünk 0.20 g CaCO3-al.
Az így kezelt talajból 4x3,00 g-ot 105x15 mm-es Wassermann-csövekbe mérünk. A kontrollt szárítószekrényben, 180°C-on sterilezzük 3 órán keresztül.
Az eljárás a kontroll és a bemért három párhuzamos talajnál a továbbiakban megegyezik.
A Wassermann-csövekbe 1,00-1,00 cm3 3% (m/m) TTC oldatot és 2,50-2,50 cm3 desztillált vizet adagolunk. A csöveket lezárjuk és tartalmukat
összekeverjük, majd a talajszuszpenziót 24 óráig 37 °C-os termosztátban inkubáljuk.
Az inkubációs idő letelte után a szuszpenziót, a Wassermanncsőből metanollal maradéktalanul beöblítve, analitikai tölcsérbe helyezett előnedvesített szűrőpapíron keresztül 50 cm3-es mérőlombikba szűrjük. Metanollal több részletben mossuk a szűrőn maradt szuszpenziót, 50 cm3 szűrlet végtérfogatig. A mérőlombikot jelig töltjük. A metanol a képződött formazán (TPF) oldószere.
A lombikokat csiszolt üvegdugóval gondosan lezárjuk.
A formazán vörös színének intenzitását 485 nm-en,spektrofotométeren mérjük, metanollal szemben.
A 0,0005-0,1 mg/cm3 koncentrációjú formazán kalibráló sorozat tagjait ugyancsak 485 nm-en mérjük, metanolt használva referenciaként.
A grafikusan készített kalibrációs görbe segítségével állapítjuk meg a talajoldat szűrletek formazán koncentrációját.
A telítetlen talaj mikrobiológiai aktivitását jól jellemző teszt.
Több célra használható, beavatkozások hatása is mérhető.
A mennyiségi jel (dehidrogenáz aktivitás) mögött álló diverzitás-változások nem érzékelhetőek. A mérési eredmény interpretálása nehéz.
Direkt kontakt teszt fejleszthető belőle.
Hamis interpretáció lehetséges.
A fény befolyásolja a színes termék képződését, zavaró hatású lehet. Ezért fénytől elzárva kell végezni a tesztet.
MSZ-08-1721/3-86