Skip to main content

Talaj oligotróf aerob heterotróf élősejt számának meghatározása telepszámlálásos technikával

Data provider

Budapest University of Technology and Economics, Department of Applied Biotechnology and Food Science, Environmental Microbiology and Biotechnology Group

Organisation/Data provider's nameBudapest University of Technology and Economics, Department of Applied Biotechnology and Food Science, Environmental Microbiology and Biotechnology Group
Name of contact
Dr. Molnár Mónika, Dr. Feigl Viktória
Contact details
Telephone/fax
+36-1-4632347
Compulsory sheet
Method Hungarian nameTalaj oligotróf aerob heterotróf élősejt számának meghatározása telepszámlálásos technikával
Method name
Soil oligotrophic aerobic heterotrophic living cell number determination by colony counting
Stage of development
after application
Standardized?
no
Name and number of the project
Terra Preta, OTKA PD
Information on the method
Method type
field experiment and its model: diversity test
Measured endpoint
Other test types
Sejtszám (telepszám)
Endpoint of the test
Other
Other endpoint
Telepszám
Number of used species
multi species test
Test organisms
More species simultaneously
Exposition scenario
Human usage: soil - agricultural
Duration of the test
long term = chronic
Description of the measurement technique
Reproducibility (%)
90.00
Deviation (%)
15.00
Selectivity
non-selective
Measuring range
Contaminant group|Typical contaminant
  • Not a chemical substance
Implementation conditions
Instrument/equipment needed to perform the measurement
steril fülke, vízfürdős termosztát, mikropipetták, autokláv
Other necessary equipment/tools
steril műanyag Petri csészék, steril táptalajok és csapvíz, steril pipettacsúcsok, lombikok
Standard materials for the test
táptalajkomponensek
How many samples are needed
1 g talaj
How many tests can be performed simultaneously with one equipment
30 minta
Data processing level
data input in PC, data evaluation by excel or other software
Necessary qualification
higher education (chemist, chemical eng., biologist, bioeng, environmental eng, microbiologist, agroeng)
Type of laboratory for testing
microbiological laboratory
Implementation costs
Purchase price of the equipment
below 40 Euro
Total cost/measurement
8 - 20 Euro
Innovation, main features
Brief concise description explaining the innovation

A módszer az oligotróf mikroorganizmusok számának meghatározására alkalmas a talajban, alapja oligotróf táptalajon történő tenyésztés és telepszámlálás. Elkülöníthetünk kopiotróf és oligotróf mikroorganizmusokat. A kopiotróf mikroorganizmusok tápanyagokban gazdag környezetben képesek gyors szaporodásra, nagy egyedszámú populációk létrehozására. Ezzel szemben az oligotróf szervezetek limitált tápanyagmennyiséget is hatékonyan tudnak kezelni, ezáltal ilyenkor kerülnek előnybe. Ezen mikrobacsoportok mennyiségének ismerete segít a talaj diverzitásának feltérképezésében.

Typical (recommended) application of the method

Laboratóriumi mikrokozmosz kísérletek és szabadföldi remediációs vagy talajjavítási technológiák hatásának monitorozására.

Limits of the method

Csak a tenyészthető mikroorganizmusok számának meghatározására alkalmas.

Is there any Protocol
yes
Detailed Protocol

Talaj hígítási sor készítése: 1 g talajt és 9 ml steril csapvizet helyezünk el egy 100 ml-es steril Erlenmeyer-lombikban, majd 30 percig rázatjuk, hogy homogén talajszuszpenziót kapjunk. Ebből tízszeres hígítási sort készítünk; a 10^2, 10^3, 10^4 hígítású tagokból végezzük el a lemezöntéseket.

A hígítási sor tagjaiból 0,1 cm^3-t helyezünk el steril, műanyag Petri-csészékben. Ezután az előre elkészített, lesterilizált, felolvasztott és vízfürdőben 50 °C-ra visszahűtött 10 cm^3 tápagarokat beleöntjük a Petri-csészékbe és finom mozdulatokkal homogenizáljuk a talajoldatokkal. A Petri-csészékben lévő keveréket hagyjuk lehűlni és megszilárdulni, ezután fejjel lefelé fordítotjuk és 30 °C-on inkubáljuk őket. A Petri-csészéket 48 óra elteltével kivesszük a termosztát szekrényből és megszámoljuk a képződött telepeket. A hígítási aránnyal beszorozva a számolt értékeket megkapjuk a db élőcsíraszám/g talaj értékeket. A telepek számlálását érdemes min. 1 hónapon keresztül het két alkalommal elvégezni.

Csökkentett tápanyagtartalmú oligotróf táptalajok összetétele és hozzávalói 1000 cm^3-re számolva:

Húslé-tápagar:
0,030 g húskivonat
0,05 g pepton
0,05 g glükóz t
22 g agar
0,005 g NaCl
desztillált víz

Maláta-tápagar:
0,2 g maláta
0,01 g pepton
0,025 g glükóz
22 g agar
desztillált víz

SWOT (evalaution based on scores)
Costs
4-low
Time requirement
3-medium
Workload requirement
3-medium
Equipment, apparata requirement
4-low
Qualified labour
3-medium
Environmental risk and workplace risks
4-low
Environmental reality
4-good
Adequate accuracy
5-excellent
Reproducibility
4-good
Cost efficiency
4-good
Feasibility
4-good
Availability
5-excellent
Well known
4-good
SWOT (evaluation in words)
Strengths

- A módszerrel jól jellemezhető a talaj mikrobiális diverzitása: az oligotróf és a kopiotróf mikróbák elkülöníthetőek és mennyiségük meghatározható.
- A különböző idő alatt kitenyésző mikróbacsoportok elkülönítésére is alkalmas.
- Jól reprodukálható, költséghatékony módszer.
- Hagyományos mikrobiológiai módszeren alapszik, nem igényel különleges szaktudást.

Weaknesses

- A telepek számlálása gyakorlatot igényel.
- A számlálás hosszú időt vesz igénybe.
- Biológiai módszerről lévén szó a módszer szórása viszonylag nagy.

Possibilities

- Nem csak talajmintákra alkalmazható, hanem pl. szennyvízmintákra, üledékmintákra és egyéb környezeti mintákra.
- Más összetételű táptalajokban is csökkenthető a tápanyagok koncentrációja, így speciális mikroorganizmus csoportok kimutatására is alkalmas lehet.

Threats

- Általános mikrobiológiai munka veszélyei.

Other information, references
Publications

Szaszák Adrienn: Talajjavító kezelések hatása a talaj mikrobiális aktivitására, Diplomamunka, BME ABÉT, 2016

Krzyak, J., Wasilkowski, D., P³aza, G. A., Mrozik, A., Brigmon, R. L., Pogrzeba, M. 2013: Culture methods as indicators of the biological quality of phytostabilized heavy metal- contaminated soil, Environmental Biotechnology 9, pp. 6-13

Completed applications
Location of the application, country
Magyarország
Location of the application, town and/or region
Mór
Year of application
2015
Application area
Characterisation of the effect of technological interventions
Environmental element the method was applied to
Technology monitoring
Environmental scenario the method was applied to
Human usage: soil - agricultural
Environmental element/phase the method was applied to
saturated soil (direct contact)
Lessons learned

A módszer alkalmazható volt talajjavító anyagok, pl. a bioszén, kávézacc, alginit mikrobiális hatásának nyomon követésére a kezelt talajokban szabadföldi kísérletben.

Contaminant the method was applied to
Not a chemical substance
Location of the application, country
Magyarország
Location of the application, town and/or region
Nyírlugos
Year of application
2015
Application area
Characterisation of the effect of technological interventions
Environmental element the method was applied to
Technology monitoring
Environmental scenario the method was applied to
Human usage: soil - agricultural
Environmental element/phase the method was applied to
saturated soil (direct contact)
Lessons learned

A módszer alkalmazható volt talajjavító anyagok, pl. a bioszén, és mikrobiális talajoltó anyagok mikrobiális hatásának nyomon követésére a kezelt talajokban tenyészedényes kísérletben.

Contaminant the method was applied to
Not a chemical substance
Properties of the datasheet
Datasheet id (original)
1817
Creator
Feigl Viktória
Status
Verified
Adatlap típusaBiological, ecotoxicological assessment and monitoring methods
Létrehozás
Módosítás