Skip to main content

Tetrahymena pyriformis direkt kontakt szaporodásgátlási teszt talajra

Data provider

Budapest University of Technology and Economics, Department of Applied Biotechnology and Food Science, Environmental Microbiology and Biotechnology Group

Organisation/Data provider's nameBudapest University of Technology and Economics, Department of Applied Biotechnology and Food Science, Environmental Microbiology and Biotechnology Group
Name of contact
Dr. Molnár Mónika, Dr. Feigl Viktória
Contact details
Telephone/fax
+36-1-4632347
Compulsory sheet
Method Hungarian nameTetrahymena pyriformis direkt kontakt szaporodásgátlási teszt talajra
Method name
Tetrahymena pyriformys direct contact test for soil
Stage of development
after application
Name and number of the project
LOKKOCK Projekt, GVOP 3.1.1.-2004-05-257/3.0
Information on the method
Method type
laboratory test: acute toxicity test
Other type
Állati toxicitási teszt
Measured endpoint
Toxicity tests
reproduction (cell number)
Endpoint of the test
EC20 / EC50 (Effective Concentration)
LC20 / LC50 (Lethal Concentration)
NOEC / NOEL No Observed Effects Concentration / Level
NOAEC / NOAEL: No Observed Adverse Effects Concentration / Level
LOEC / LOEL: Lowest Observed Adverse Effects Concentration / Level
Other endpoint
Sejtek mérete, egészsége
Number of used species
other
Test organisms
Animal
Other test organisms
egysejtű állat
Exposition scenario
Characterisation of air
Duration of the test
long term = chronic
Description of the measurement technique
Selectivity
non-selective
Measuring range
Contaminant group|Typical contaminant
  • Metals, semi-metals and their compounds
Selectivity
non-selective
Measuring range
Contaminant group|Typical contaminant
  • Chlorophenols
  • pentachlorophenol = chlorophene
Lower limit
25.00 mg/kg
Selectivity
selective
Measuring range
Contaminant group|Typical contaminant
  • Other organic chemical substance
Selectivity
non-selective
Measuring range
Contaminant group|Typical contaminant
  • Other organic chemical substance
  • Drug residue
Implementation conditions
Instrument/equipment needed to perform the measurement
mikroszkóp vagy elektronikus részecskeszámláló
Other necessary equipment/tools
laboratóriumi üvegedények, eszközök, termosztát, rázógép
Reagents/materials for the test
tápoldat, formalin
How many samples are needed
2,5 g
Data processing level
data input in PC, data evaluation by excel or other software
Necessary qualification
secondary education (chemical technician, chemical worker, laboratory assistant)
Type of laboratory for testing
microbiological laboratory
Implementation costs
Purchase price of the equipment
2.000 - 4.000 Euro
Labour cost/measurement
20 - 40 Euro
Total cost/measurement
20 - 40 Euro
Innovation, main features
Brief concise description explaining the innovation

Egysejtű állati tesztorganizmust alkalmazó teszt, a kockázatfelmérésben és a PNEC képzésében hiánypótló, az állati trófikus szintet reprezentálja. Összhasonlítva magasabb rendű álati tesztekkel egyszerűsíti a kivitelezhetőséget, növeli a gyorsaságot, az ismételhetőséget, és csökkenti az ismételhetőség éa a tesztek számának korlátait. A teszt direkt kontaktust biztosító kivitelben is alkalmazható, így a mért toxicitás a szennyezőanyag hozzáférhetőségét is jellemzi.

Typical (recommended) application of the method

Talajkivonat és direkt kontaktust biztosító tesztként talajra és szilárd fázisú mintákra is alkalmazható.

Limits of the method

A megfelelő kiértékeléshez gyakorlott szakember kell.

Is there any Protocol
yes
Detailed Protocol

1. A vizsgálandó talajokat szobahőmérsékleten szárítani, homogenizálni kell.
2. Minden mintából 0,25g-ot be kell mérni egy-egy kémcsőbe. A mintákat autoklávban sterilezni kell 121 °C-on 40 percig.
3. Minden mintához steril körülmények között, 5 ml TP tápoldatot, 0,078 ml 1:1:1 arányú antibiotikum keveréket és 0,01 ml 6 napos Tetrahymena pyrirformis tenyészetet kell pipettázni. A szennyezett mintákon kívül egy 10 párhuzamos steril mintából álló szennyezetlen kontroll sorozatot is indítani kell ugyanolyan körülmények között.
4. Az így beoltott mintákat – két erdőtalaj kontrollt kivéve – 400 rpm fordulatszámú rázógépre tenni és 20 °C-on inkubálni kell.
5. A teszt során 5 alkalommal kell mintát venni, mindennap egyszer. Az egyes mintákban található élő tesztorganizmusok számának meghatározása mikroszkóppal történik. Minden alkalommal 1 ml mintához 0,06 ml 0,5%-os formalin oldatot kell adni (0,025 ml formalin és 4,975 ml víz elegye), majd pár perces várakozás után az így előkészített mintából 2 mikrolitert kell egy Bürker kamra rácsrészére cseppenteni.

SWOT (evalaution based on scores)
Costs
4-low
Time requirement
2-high
Workload requirement
2-high
Equipment, apparata requirement
4-low
Qualified labour
3-medium
Environmental risk and workplace risks
5-very low
Environmental reality
3-average
Adequate accuracy
3-average
Reproducibility
3-average
Cost efficiency
3-average
Feasibility
4-good
Availability
2-weak
Well known
2-weak
SWOT (evaluation in words)
Strengths

Más állati tesztekhez képest rövid időigényű és az állat életciklusát nézve akut teszt. A tesztorganizmus jellegzetes formája megkönnyíti a detektálást.
Krónikus tesztként is alkalmazható, ha az utódok számát is értékeljük.

Weaknesses

Nagy a teszt munkaigénye. A mikroszkópos detektálás gyengeségeiből adódik, hogy a kiértékelés fárasztó, kis pontosságú. Nagy hígítás miatt romolhat az érzékenység.

Possibilities

A vegyi anyagok és szennyezett területek kockázatfelmrésében az állati trófikus szintet jellemzi, amire kevés lehetőség van az akut és krónikus állati tesztek hiánya miatt.

Threats

Ha a szaporodás monitoringjához végzett mintavételek időben túl távol esnek egymástól, a növekedés exponenciális szakasza átugorható, így a szaporodási és a gátlási görbe nehezen értékelhető.

Other information, references
Important findings, points of interest, remarks

Olyan állati tesztorganizmus a Tetrahymena pyriformis, mely jól reprezentálja a talajlakó állatokat és akár a magasabb rendűeket is. Nagyon munka- és időigényes, mert a sejtszám megállapítása mikroszkóppal történik. Környezeti realitása nagy.

Webpage references and DEMO reports
Publications

Gruiz, Horváth és Molnár (2001) Környezettoxikológia – Vegyi anyagok hatása az ökoszisztémára, Műegy.Kiadó, Bp.
Leitgib,L.; Kálmán,J.; Gruiz K. (2007) Comparison of bioassays by testing whole soil and their water extract from contaminated sites, Chemosphere, 66(3) pp.428-434,

Completed applications
Location of the application, country
Magyarország
Location of the application, town and/or region
Gyöngyösoroszi
Year of application
2007
Environmental problem the method was applied to (old)
Measurement of the harmful effect:Toxicity, mutegenity and teratogenity testing of environmental samples
Environmental scenario the method was applied to
Terrestial habitat: polluted soil
Environmental element/phase the method was applied to
unsaturated soil (direct contact)
Lessons learned

Toxikus fémmel szennyezett talaj és üledék direkt érintekeztetéses tesztelése során a tesztállat válasza a mozgékony, biológialag hozzáférhető fémmennyiséggel arányos.

Pictures
Properties of the datasheet
Datasheet id (original)
47
Creator
Weiszburg Lilla
Status
Verified
Adatlap típusaBiological, ecotoxicological assessment and monitoring methods
Létrehozás
Módosítás